在離子色譜柱分離檢測(cè)過(guò)程中，分析物和基質(zhì)污染能使固定相受到影響，我們?cè)谑褂眠^(guò)程中應(yīng)當(dāng)注意固定相表面特殊性質(zhì)可能與分析物相互作用而使反相色譜柱受到污染產(chǎn)生反壓?jiǎn)栴}，今天我們就來(lái)分析一下，導(dǎo)致IC離子色譜柱污染的因素有哪些?

　　在色譜柱上有很多填料，包括聚合物，聚合物表面涂上硅膠和氧化鋁，無(wú)機(jī)-有機(jī)混合物，涂層氧化鋯和石墨化碳都存在于這些鍵合硅膠上;為增加色譜柱的應(yīng)用，常利用各種流動(dòng)相和添加物作用于色譜柱，添加物可以改變或修飾填料的表面，有時(shí)候還有可能會(huì)污染鍵合相表面;硅膠表面的疏水鍵合相是硅烷醇，殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中，這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物反應(yīng)成為基質(zhì)成分。

　　樣品中含有的鹽、脂質(zhì)、含脂物質(zhì)、腐質(zhì)酸、疏水蛋白質(zhì)和其它一些物質(zhì)是一些可能在使用時(shí)與HPLC柱發(fā)生相互作用的物質(zhì)。有些物質(zhì)有比待測(cè)物或少或大的保留值，那些保留值較小的物質(zhì)如鹽類一般來(lái)說(shuō)在空體積時(shí)就被沖出色譜柱，這些非目標(biāo)產(chǎn)物的干擾能被檢測(cè)器檢測(cè)到而且能形成色譜峰，氣泡，基線上移或者是負(fù)峰。如果樣品成分在柱子中有很強(qiáng)的保留而且流動(dòng)相溶液成分不足以把這些物質(zhì)洗脫下來(lái)，多次上樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會(huì)積累在柱頭。這些行為通常只有通過(guò)平行實(shí)驗(yàn)才能發(fā)現(xiàn)。有著中等保留值的樣品能被緩慢洗出而且表現(xiàn)為寬峰，基線擾動(dòng)，或者基線漂移。

　　我們?cè)趯?duì)離子色譜柱進(jìn)行維護(hù)時(shí)，要遵循這幾個(gè)原則：確保離子色譜不干燥，不長(zhǎng)霉，不進(jìn)顆粒物;不進(jìn)入入可逆吸附物，特別是有機(jī)污染物，在一定的流速和壓力條件下運(yùn)行。

　　在清洗離子色譜柱時(shí)，要遵循這幾個(gè)原則原則：用高濃度的淋洗液清洗強(qiáng)保留的污染物;用有機(jī)酸如草酸、酒石酸，檸檬酸等清洗金屬污染物;用有機(jī)溶劑兼容的大濃度清洗有機(jī)污染物;清洗之后，必須用二次去離子水平衡。雖然對(duì)有機(jī)溶劑兼容的離子色譜柱，受污染后都可以用清洗后再生，但并不是所有的污染物都能夠通過(guò)清洗去除的，正確使用離子色譜柱和采用合適的樣品預(yù)處理手段是延長(zhǎng)離子色譜柱壽命的好方法。

　　離子色譜柱污染了怎么辦?如何清洗?

　　離子色譜柱的再生一般的情況下效果不是很好.應(yīng)該根據(jù)情況確定再生方法;一般鍵合硅石基質(zhì)的離子色譜柱可100%兼容有機(jī)溶劑，高聚物基質(zhì)的離子色譜柱交連度大于50%的也可100%兼容有機(jī)溶劑，可用純的有機(jī)溶劑來(lái)沖洗柱子以消除有機(jī)物的污染，但是應(yīng)注意一點(diǎn)有機(jī)溶劑沖洗以前先用甲醇/水混合物沖洗，再用100%甲醇沖洗，后用有機(jī)溶劑沖洗，再用100%甲醇沖洗，再用甲醇/水混合物沖洗，再用水沖洗，千萬(wàn)不可直接用純有機(jī)溶劑沖洗，過(guò)后也千萬(wàn)不可直接用水沖洗，對(duì)于交連度小于50%的高聚物色譜柱，因?qū)τ袡C(jī)溶劑的兼容性差，有機(jī)物沖洗對(duì)柱效都有損壞。如果柱子是由于蛋白質(zhì)、多環(huán)芳烴以及柱內(nèi)滋生菌類或藻類或樹脂發(fā)生分解這幾種情況解決的方法只能是更換色譜柱。